实时定量pcr内参以及相对标准曲线的问题
做定量PCR的话，一般不会在一个样品中加入两对引物，内参和你的目的基因都是分别进行反应的。比如说你有3个样品，每个样品需要测定目的基因A，B和内参，那就做3*3*3=27个孔就好了，3个样品，每个样品测三个基因，每一个基因做3个重复取平均。
标准曲线的话，既然你已经做内参了，标准曲线就不用做了。把你的目的基因测得的量除以内参，做一个标准化就可以比较不同样品中目的基因的差异了。
这个就是SYBR GREEN的局限了。你要做内参 话，必须在不同的管子里面另外在同时做。就像楼下说的那样。这样的话，不同管子见的加样误差就会干扰实验数据。
内参的目的就是来对照加样误差的。
实际上，真正的内参是在同一个管子里面完成的。不过不是用SYBR GREEN来做的。而是用Taqman 引物和探针组合来做的。在同一个管子里面，同时加入你目的基因和内参基因的引物，而目的基因的探针使用FAM荧光素标记，而内参则使用VIC荧光素标记。这样反应同时进行，而且不受不同管子间加样误差的影响。
标准曲线，一般是使用已知浓度的，带有目的基因的质粒来做的。你说的那个方法，不是标准曲线，仍然是相对浓度的梯度稀释而已。
激走战队车连者的交通工具
超速赛车 Speeder Machines
车连者五人驾驶的超速赛车，有四位车手的超速赛车时速是350Km/h，唯独蓝车手的赛车比较快，可高达到450Km/h，而且除了这辆车并无搭载任何武器装备，其余赛车分别搭载着超速光枪、超速导弹、超速切盘以及超速雷射等赛车武器。
超速巡逻摩托 Polispeeder
信号人驾驶的警用摩托车，最快时速可达500km。 被封进陨石的两辆野性之车－
在很久远之前的天之川，有着两辆谁的心灵都无法与之契合的野性汽车。无论任何宇宙人想上去搭乘最后都是无功而返。一辆如同天马般高速疾驰；另一辆则拥有飞龙般强大的马力，这样的两辆车出现在神仙的面前，就是牛郎和织女，由于只有每年七夕这天，牛郎织女才能相互碰面，却屡次遭两辆野性之车所阻碍，于是直接对宇宙之神告状，希望能让它们停止行动。了解一切的宇宙之神便将两辆野性之车封印在宇宙的某个陨石里头...
天马雷霆 Pegasus Thunder
宇宙传说中的野性之车（跑车），具有飞翔（Sky Mode）及奔驰两种模式。驾驶者为红车手（阵内恭介）。
武器配备：天马雷射 Pegasus Laser、天马最终爆炎 Pegasus Final Burning
天龙巡航 Dragon Cruiser
宇宙传说中的野性之车（吉普车） 驾驶者为蓝车手（土门直树）
武器配备：瞬时闪光 Passing Flash、龙之钩爪 Dragon Claw 连者战车 Ranger Vehicle
这五辆汽车意义可是很重大的，自从恭介他们对这些亲自打造的车子发誓，一定要保卫地球的和平，追随哈札特星的星座传说，消灭危害安宁的宇宙暴走族，然后再造一辆梦想中的车子在路上奔跑，借由哒布与车连者的心灵与星座传说的相互连结之下，五辆汽车与星座传说力量融合，成为巨大的五色运输车。
红连者跑车 Red Vehicle
全长：22m
重量：900t
最高速度：1.5马赫
红车手所驾驶的跑车型战车，为RV ROBO的头及胸部，能放出天马雷射。
蓝连者连结车 Blue Vehicle
全长：26.5m
重量：2500t
最高速度：800km/h
蓝车手所驾驶的连结车型战车，为RV ROBO的下身。
绿连者厢型车 Green Vehicle
全长：25.8m
重量：1500t
最高速度：840km/h
绿车手所驾驶的厢型车型战车，为RV ROBO的右脚。
黄色四驱车 Yellow Vehicle
全长：25.8m
重量：1500t
最高速度：840km/h
黄车手所驾驶的四驱车型战车，为RV ROBO的左脚，能放出修复故障的光束。
粉红休旅车 Pink Vehicle
全长：23m
重量：1100t
最高速度：889km/h
粉红车手所驾驶的休旅车型战车，为RV ROBO的双手，具备能照出敌人行踪及弱点的探照灯。
激走合体 RV金刚 RV Robo
五辆巨型运输车，执行激走合体成为五辆车的综合体，成为RV金刚。 ‘引擎开动 RV金刚’
高度：55m
重量：7500t
武器：RV剑 RV Sword、轮胎回旋盾 Radial Shield
绝招：闪烁星光束 Plugnado Spark、VR剑爆转技．激走斩（必杀技）、RV浪速飞踢、黄色战车直踢、黄色旋转车轮踢、粉红汽车重拳以及RV发夹旋踢。
胜利连者战车 Victory Ranger Vehicle
VRV大师从宇宙带来地球的五辆超级战车，其巨大车库位于东京巨蛋内。
V消防车 V Fire
全长：26m（消防车形态）
全高：31m（战士形态）
重量：2300t
最高速度：800km/h
红车手所驾驶的消防车型战车，为VRV ROBO的头部及胸部，能变成人型战士Fire Fighter。
V巡逻车 V Police
全长：30m（巡逻车形态）
全高：33m（战士形态）
重量：2400t
最高速度：1.5马赫
蓝车手所驾驶的警车型战车，为VRV ROBO的下身，能变成人型战士Police Fighter。
V砂石车 V Dump
全长：26m（砂石车形态）
全高：31m（战士形态）
重量：2500t
最高速度：700km/h
绿车手所驾驶的砂石车型战车，为VRV ROBO的右脚，能变成人型战士Dump Fighter，能从车斗上倾倒出许多大铁球攻击。
V推土机 V Dozer
全长：29m（推土机形态）
全高：30.5m（战士形态）
重量：2500t
最高速度：750km/h
黄车手所驾驶的推土机型战车，为VRV ROBO的左脚，能变成人型战士Dozer Fighter。
V救护车 V Rescue
全长：22m（救护车形态）
全高：31m（战士形态）
重量：1550t
最高速度：750km/h
粉红车手所驾驶的救护车型战车，为VRV ROBO的双手，装备有大型导弹，能变成人型战士Rescue Fighter。
必胜合体 VRV金刚 VRV Robo
于31话登场，由五辆VRV战车合体为VRV金刚。
拥有‘必将胜利带回之机器人’美名，也是目前超级战队系列中唯一一架分离后，可各自变为小型机器人的机体。合体时会消耗大量的汽车魔力。‘引擎全开动 VRV金刚’
高度：60m
重量：11250t
出力：3000万hp/t
动力来源：汽车魔力
武器：强力喷水枪、V速射枪V-gun
绝招：胜利双连星Victory Twister（V火神炮V-vulcan +V火箭筒V-bazooka）。
特别版 浪速金刚
仅于第40话登场一次的特别版合体。
RV金刚的双手及双脚及VRV金刚的主体都被破坏的无法再继续战斗之时，绿车手想到了用RV金刚的主体和VRV的四肢合体。
绿车手的主意，虽换来其他成员的质疑，但最后却完成了奇迹的‘浪速合体’，绿车手将其名为‘天下之浪速金刚 特别版’。
合体完之后，背景也出了大大的浪速二字，必杀技为“Plugnado Spark”、“Victory Twister”同时发射。
胜利拖车 Victrailer
由VRV至尊驾驶，三节格纳库分别搭载运输五辆VRV战车，可在战车出动后变形为巨大基地（亦为战斗模式）。
支援并能提供VRV金刚武器（V火神炮、V火箭筒）。
全长：120m（拖车形态）
全高：20m（拖车形态）、66m（战斗模式）
全幅：54m
重量：50000t
最高速度：300km/h
警报者 Sirender
当信号人吹响信号警哨时，巨大巡逻车警报者 Sirender便会紧急出动。 喊出变形口号“Stand up!Sirender!”，就会从巡逻车型态变化为机器人型态。
全长：28m（巡逻车）
全高：10m（巡逻车）/40m（机器人）
全幅：17.5m（巡逻车）/22.5m（机器人）
重量：2500t
出力：1800万马力
武器：警用匕首、警报火神炮、防暴盾、手铐
绝招：信号闪光 Signal Flash、火神炮击
拉洁号
拉洁塔的深白色猫敞篷车，能变换成机器人模式。变形口令为“变形! 拉洁号机器人!”。
并不是由拉洁塔搭乘驾驶，而是以远端遥控装置遥控机器人的行动。跟它萌系的外观相比，其威力不容小觑。
拉洁号机器人的能量，只够在地球上活动一分钟。但经过改良之后，则可进行巨大化战斗。